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                大鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒供应商
                点击次数:1386 发布时间:2013-09-16

                 

                本试剂盒仅供研究使用。
                检测范围:                                                         48T
                6μmol/L -200μmol/L
                 
                使用目的:
                本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肌酐(Cr)含量
                实验原理
                本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肌酐(Cr)水平。用纯化的大鼠肌酐(Cr)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肌酐(Cr)再与HRP标记的肌酐(Cr)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的肌酐(Cr)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠肌酐(Cr)浓度。
                试剂盒组成

                1
                20倍浓缩洗涤液
                20ml×1瓶
                7
                终止液
                3ml×1瓶
                2
                酶标试剂
                3ml×1瓶
                8
                标准品(400μmol/L)
                0.5ml×1瓶
                3
                酶标包被板
                12孔×4条
                9
                标准品稀释液
                1.5ml×1瓶
                4
                样品稀释液
                3ml×1瓶
                10
                说明书
                1份
                5
                显色剂A液
                3ml×1瓶
                11
                封板膜
                2张 
                6
                显色剂B液
                3ml×1/瓶
                12
                密封袋
                1个

                大鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒供应商标本要求
                1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
                2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
                操作步骤
                1.         标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

                200μmol/L
                5号标准品
                150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
                100μmol/L
                4号标准品
                150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
                50μmol/L
                3号标准品
                150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
                25μmol/L
                2号标准品
                150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
                12.5μmol/L
                1号标准品
                150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

                2.         加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
                3.         温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。  
                4.         配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
                5.         洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
                6.         加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
                7.         温育:操作同3。
                8.         洗涤:操作同5。
                9.         显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
                10.     终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
                11.     测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
                大鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒供应商操作程序总结:
                 
                计算
                  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
                注意事项
                1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
                2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
                3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
                4. 请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
                5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                6.底物请避光保存。
                7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
                8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
                9.本试剂不同批号组分不得混用。
                10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
                大鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒供应商保存条件及有效期
                1.试剂盒保存:;2-8℃。
                2.有效期:6个月

                 

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